ما هو بولي أكريلاميد الكهربائي للهلام؟

بولي أكريلاميد جل الكهربائي

الرحلان الكهربائي للهلام هو تقنية أساسية في المختبرات عبر التخصصات البيولوجية ، مما يسمح بفصل الجزيئات الكبيرة مثل DNA و RNA والبروتينات.تسمح وسائط وآليات الفصل المختلفة بفصل مجموعات فرعية من هذه الجزيئات بشكل أكثر فعالية من خلال استغلال خصائصها الفيزيائية.بالنسبة للبروتينات على وجه الخصوص ، غالبًا ما يكون التحليل الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد (PAGE) هو الأسلوب المفضل.

1

PAGE هي تقنية تفصل الجزيئات الكبيرة مثل البروتينات بناءً على حركتها الكهربي ، أي قدرة التحليلات على التحرك نحو قطب كهربائي من الشحنة المعاكسة.في PAGE ، يتم تحديد ذلك من خلال الشحنة والحجم (الوزن الجزيئي) وشكل الجزيء.تتحرك التحليلات عبر المسام المتكونة في هلام بولي أكريلاميد.على عكس الحمض النووي والحمض النووي الريبي ، تختلف البروتينات في الشحنة وفقًا للأحماض الأمينية المدمجة ، والتي يمكن أن تؤثر على كيفية عملها.قد تشكل سلاسل الأحماض الأمينية أيضًا هياكل ثانوية تؤثر على حجمها الظاهري وبالتالي على كيفية قدرتها على التحرك عبر المسام.لذلك قد يكون من المرغوب في بعض الأحيان تغيير طبيعة البروتينات قبل الرحلان الكهربائي لجعلها خطية إذا تطلب الأمر تقديرًا أكثر دقة للحجم.

صفحة SDS

الرحلان الكهربائي للهلام بولي أكريلاميد كبريتات الصوديوم هو تقنية تستخدم لفصل جزيئات البروتين ذات الكتل من 5 إلى 250 كيلو دالتون.يتم فصل البروتينات فقط على أساس وزنها الجزيئي.يتم إضافة كبريتات دوديسيل الصوديوم ، وهو عامل خافض للتوتر السطحي أنيوني ، في تحضير المواد الهلامية التي تخفي الشحنات الجوهرية لعينات البروتين وتعطيها شحنة مماثلة لنسبة الكتلة.بكلمات بسيطة ، إنه يفسد البروتينات ويمنحها شحنة سالبة.

2

الصفحة الأصلية

Native PAGE هي تقنية تستخدم مواد هلامية غير مشوهة لفصل البروتينات.على عكس SDS PAGE ، لا يتم إضافة عامل تغيير طبيعة في تحضير المواد الهلامية.نتيجة لذلك ، يتم فصل البروتينات على أساس شحنة البروتينات وحجمها.في هذه التقنية ، تعتبر سلاسل التشكل والطي والأحماض الأمينية للبروتينات هي العوامل التي يعتمد عليها الفصل.لا تتلف البروتينات في هذه العملية ، ويمكن استعادتها بعد الانتهاء من الفصل.

3

كيف يعمل البولي أكريلاميد الكهربائي للهلام (PAGE)؟

المبدأ الأساسي لـ PAGE هو فصل المواد التحليلية عن طريق تمريرها عبر مسام هلام بولي أكريلاميد باستخدام تيار كهربائي.لتحقيق ذلك ، يتم بلمرة مزيج الأكريلاميد - بيساكرلميد (بولي أكريلاميد) عن طريق إضافة بيرسلفات الأمونيوم (APS).التفاعل ، الذي يتم تحفيزه بواسطة tetramethylethylenediamine (TEMED) ، يشكل شبكة تشبه الهيكل مع المسام التي يمكن أن تتحرك التحليلات من خلالها (الشكل 2).كلما زادت النسبة المئوية الكلية لمادة الأكريلاميد الموجودة في الهلام ، كلما كان حجم المسام أصغر ، وبالتالي قلت البروتينات التي يمكن أن تمر من خلالها.ستؤثر نسبة الأكريلاميد إلى بيساكريلاميد أيضًا على حجم المسام ولكن غالبًا ما يظل هذا ثابتًا.تعمل أحجام المسام الأصغر أيضًا على تقليل السرعة التي يمكن للبروتينات الصغيرة أن تتحرك بها عبر الهلام ، مما يحسن من دقة وضوحها ويمنعها من الانطلاق في المخزن المؤقت بسرعة عند تطبيق التيار.

3-1

معدات الرحلان الكهربائي لبولي أكريلاميد

خلية الرحلان الكهربائي الهلامية (الخزان / الغرفة)
يختلف خزان الهلام الخاص بالحلل الكهربائي للهلام بولي أكريلاميد (PAGE) عن خزان هلام الاغاروز.يكون خزان هلام agarose أفقيًا ، بينما يكون خزان PAGE عموديًا.بواسطة خلية التفريد العمودي (الخزان / الغرفة) ، يُسكب هلام رفيع (عادة 1.0 مم أو 1.5 مم) بين لوحين زجاجيين ويتم تثبيته بحيث يتم غمر الجزء السفلي من الجل في مخزن مؤقت في غرفة واحدة ويتم غمر الجزء العلوي في المخزن المؤقت في غرفة أخرى.عند تطبيق التيار ، تنتقل كمية صغيرة من المخزن المؤقت عبر الهلام من الغرفة العلوية إلى الحجرة السفلية.مع المشابك القوية لضمان بقاء التجميع في وضع رأسي ، تسهل المعدات عمليات تشغيل سريعة بالهلام مع تبريد متساوٍ ينتج عنه نطاقات متميزة.

4

تقوم شركة Beijing Liuyi Biotechnology Co.، Ltd. (Liuyi Biotechnology) بتصنيع مجموعة من الأحجام من خلايا البولي أكريلاميد الكهربائي للهلام (خزانات / غرف).إن طرازي DYCZ-20C و DYCZ-20G عبارة عن خلايا كهربائية عمودية (خزانات / غرف) لتحليل تسلسل الحمض النووي.تتوافق بعض خلايا الرحلان الكهربائي العمودي (الخزانات / الغرف) مع نظام النشاف ، مثل الموديل DYCZ-24DN و DYCZ-25D و DYCZ-25E متوافق مع طراز نظام النشاف الغربي DYCZ-40D و DYCZ-40G و DYCZ-40F ، التي تستخدم لنقل جزيء البروتين من الجل إلى الغشاء.بعد الرحلان الكهربائي SDS-PAGE ، يعد Western Blotting تقنية للكشف عن بروتين معين في خليط البروتين.يمكنك اختيار أنظمة النشاف هذه وفقًا لمتطلبات التجربة.

6

إمداد طاقة الرحلان الكهربي
لتوفير الكهرباء لتشغيل الجل ، ستحتاج إلى مصدر طاقة كهربائي.في Liuyi Biotechnology ، نقدم مجموعة من مصادر الطاقة الكهربائية لجميع التطبيقات.يمكن أن يلبي الطرازان DYY-12 و DYY-12C بجهد تيار وحالة مستقرتين عاليًا متطلبات الرحلان الكهربي.لديها وظيفة الوقوف والتوقيت وتطبيق VH خطوة بخطوة.إنها مثالية لتطبيق الرحلان الكهربائي لتسلسل IEF و DNA.بالنسبة لتطبيق الرحلان الكهربي للبروتين والحمض النووي ، لدينا نموذج DYY-2C و DYY-6C و DYY-10 وما إلى ذلك ، والتي تعد أيضًا مصدر طاقة للمبيعات الساخنة مع خلايا الفصل الكهربائي (خزانات / غرف).يمكن استخدامها لتطبيقات الرحلان الكهربائي للجهد المتوسط ​​والمنخفض ، مثل استخدام مختبر المدرسة ومختبر المستشفى وما إلى ذلك.المزيد من نماذج إمدادات الطاقة ، يرجى زيارة موقعنا على شبكة الإنترنت.

7

تتمتع علامة Liuyi التجارية بأكثر من 50 عامًا من التاريخ في الصين ويمكن للشركة توفير منتجات مستقرة وعالية الجودة في جميع أنحاء العالم.من خلال سنوات التطوير ، فهي تستحق اختيارك!

For more information about us, please contact us by email [email protected] or [email protected]

مراجع لما هو بولي أكريلاميد الكهربائي للهلام؟
1. كارين ستيوارد دكتوراه بولي أكريلاميد الهلام الكهربائي ، كيف يعمل ، المتغيرات التقنية ، وتطبيقاتها


الوقت ما بعد: 23 مايو - 2022