ما هو الكهربائي هلام بولي أكريلاميد؟

بولي أكريلاميد جل الكهربائي

يعد الفصل الكهربائي الهلامي تقنية أساسية في المختبرات عبر التخصصات البيولوجية، مما يسمح بفصل الجزيئات الكبيرة مثل DNA وRNA والبروتينات. تسمح وسائط وآليات الفصل المختلفة بفصل مجموعات فرعية من هذه الجزيئات بشكل أكثر فعالية من خلال استغلال خصائصها الفيزيائية. بالنسبة للبروتينات على وجه الخصوص، غالبًا ما يكون الفصل الكهربائي لهلام بولي أكريلاميد (PAGE) هو الأسلوب المفضل.

PAGE هي تقنية تفصل الجزيئات الكبيرة مثل البروتينات بناءً على حركتها الكهربية، أي قدرة المواد التحليلية على التحرك نحو قطب كهربائي ذي شحنة معاكسة. في PAGE، يتم تحديد ذلك حسب الشحنة والحجم (الوزن الجزيئي) وشكل الجزيء. تتحرك التحاليل عبر المسام المتكونة في هلام بولي أكريلاميد. على عكس DNA وRNA، تختلف البروتينات في الشحن وفقًا للأحماض الأمينية المدمجة، والتي يمكن أن تؤثر على كيفية عملها. قد تشكل سلاسل الأحماض الأمينية أيضًا هياكل ثانوية تؤثر على حجمها الظاهري وبالتالي على كيفية قدرتها على التحرك عبر المسام. لذلك قد يكون من المرغوب في بعض الأحيان تشويه البروتينات قبل الترحيل الكهربائي لجعلها خطية إذا كان هناك حاجة إلى تقدير أكثر دقة للحجم.

صفحة الحزب الديمقراطي الصربي

الفصل الكهربائي لهلام بولي أكريلاميد كبريتات دوديسيل الصوديوم هو تقنية تستخدم لفصل جزيئات البروتين ذات الكتل من 5 إلى 250 كيلو دالتون. يتم فصل البروتينات فقط على أساس وزنها الجزيئي. تتم إضافة كبريتات دوديسيل الصوديوم، وهي مادة خافضة للتوتر السطحي أنيونية، في تحضير المواد الهلامية التي تخفي الشحنات الجوهرية لعينات البروتين وتمنحها نسبة شحن مماثلة إلى الكتلة. وبكلمات بسيطة، فإنه يفسد طبيعة البروتينات ويمنحها شحنة سالبة.

الصفحة الأصلية

Native PAGE هي تقنية تستخدم المواد الهلامية غير المشوهة لفصل البروتينات. على عكس SDS PAGE، لا تتم إضافة أي عامل تغيير طبيعة في تحضير المواد الهلامية. ونتيجة لذلك، يتم فصل البروتينات على أساس شحنة البروتينات وحجمها. في هذه التقنية، تكون سلاسل التشكل والطي والأحماض الأمينية للبروتينات هي العوامل التي يعتمد عليها الانفصال. لا تتضرر البروتينات في هذه العملية، ويمكن استعادتها بعد الانتهاء من الانفصال.

كيف يعمل الفصل الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد (PAGE)؟

المبدأ الأساسي لـ PAGE هو فصل التحاليل عن طريق تمريرها عبر مسام هلام بولي أكريلاميد باستخدام تيار كهربائي. ولتحقيق ذلك، تتم بلمرة مزيج الأكريلاميد-بيساكريلاميد (بولي أكريلاميد) بإضافة فوق كبريتات الأمونيوم (APS). يشكل التفاعل، الذي يتم تحفيزه بواسطة رباعي ميثيل إيثيلين ديامين (TEMED)، بنية تشبه الشبكة مع مسام يمكن أن تتحرك من خلالها التحاليل (الشكل 2). كلما زادت نسبة إجمالي مادة الأكريلاميد الموجودة في الجل، قل حجم المسام، وبالتالي قل حجم البروتينات التي يمكنها المرور عبرها. ستؤثر نسبة الأكريلاميد إلى البيساكريلاميد أيضًا على حجم المسام ولكن هذا غالبًا ما يظل ثابتًا. تقلل أحجام المسام الأصغر أيضًا من السرعة التي تتمكن بها البروتينات الصغيرة من التحرك عبر الجل، مما يحسن دقتها ويمنعها من الجريان إلى المخزن المؤقت بسرعة عند تطبيق التيار.

معدات للرحلان الكهربائي للهلام بولي أكريلاميد

خلية الرحلان الكهربائي الهلامي (الخزان/الحجرة)
يختلف خزان الجل الخاص بالرحلان الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد (PAGE) عن خزان هلام الاغاروز. خزان هلام الاغاروز أفقي، في حين أن خزان الصفحة عمودي. بواسطة خلية الرحلان الكهربائي العمودي (الخزان/الغرفة)، يتم سكب هلام رقيق (عادة 1.0 مم أو 1.5 مم) بين لوحين زجاجيين ويتم تثبيته بحيث يتم غمر الجزء السفلي من الهلام في المخزن المؤقت في حجرة واحدة ويتم غمر الجزء العلوي في المخزن المؤقت في غرفة أخرى. عند تطبيق التيار، تهاجر كمية صغيرة من المخزن المؤقت عبر الجل من الغرفة العلوية إلى الغرفة السفلية. مع المشابك القوية لضمان بقاء التجميع في وضع مستقيم، تسهل المعدات تشغيل الجل بسرعة مع تبريد متساوٍ مما يؤدي إلى أشرطة مميزة.

تقوم شركة Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) بتصنيع مجموعة من الأحجام من خلايا الترحيل الكهربي الهلامي بولي أكريلاميد (خزانات/غرف). نماذج DYCZ-20C وDYCZ-20G عبارة عن خلايا رحلان كهربائي عمودي (خزانات/غرف) لتحليل تسلسل الحمض النووي. بعض خلايا الرحلان الكهربائي العمودي (الخزانات/الغرف) متوافقة مع نظام النشاف، مثل طراز DYCZ-24DN، وDYCZ-25D، وDYCZ-25E المتوافقة مع طراز نظام النشاف الغربي DYCZ-40D، وDYCZ-40G، وDYCZ-40F، والتي تستخدم لنقل جزيء البروتين من الجل إلى الغشاء. بعد إجراء الترحيل الكهربي SDS-PAGE، تعد النشاف الغربي تقنية للكشف عن بروتين معين في خليط البروتين. يمكنك اختيار أنظمة النشاف هذه وفقًا للمتطلبات التجريبية.

إمدادات الطاقة الكهربائي
لتوفير الكهرباء اللازمة لتشغيل الجل، سوف تحتاج إلى مصدر طاقة كهربائي. في Liuyi Biotechnology نحن نقدم مجموعة من إمدادات الطاقة الكهربائية لجميع التطبيقات. يمكن للطراز DYY-12 وDYY-12C ذو الجهد والتيار العالي المستقر أن يلبي متطلبات الجهد الكهربائي العالي. لديها وظيفة الوقوف، والتوقيت، وVH والتطبيق خطوة بخطوة. فهي مثالية لتطبيق IEF وتسلسل الحمض النووي الكهربائي. بالنسبة للتطبيق العام للرحلان الكهربي للبروتين والحمض النووي، لدينا نماذج DYY-2C، DYY-6C، DYY-10، وما إلى ذلك، والتي تعد أيضًا مصادر طاقة رائجة البيع مع خلايا الرحلان الكهربي (الخزانات/الغرف). يمكن استخدامها لتطبيقات الرحلان الكهربائي ذات الجهد المتوسط ​​والمنخفض، مثل استخدام معمل المدرسة ومختبر المستشفى وما إلى ذلك. المزيد من النماذج لإمدادات الطاقة، يرجى زيارة موقعنا على الانترنت.

تتمتع العلامة التجارية Liuyi بتاريخ يزيد عن 50 عامًا في الصين ويمكن للشركة تقديم منتجات مستقرة وعالية الجودة في جميع أنحاء العالم. من خلال التطوير لسنوات، فهو يستحق اختيارك!

لمزيد من المعلومات عنا، يرجى الاتصال بنا عن طريق البريد الإلكتروني[البريد الإلكتروني محمي] or [البريد الإلكتروني محمي].

مراجع ما هو الفصل الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد؟
1. دكتوراه كارين ستيوارد، الفصل الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد، كيف يعمل، متغيرات التقنية، وتطبيقاته