تحسين الترحيل الكهربائي للهلام: أفضل الممارسات لحجم العينة والجهد والتوقيت

مقدمة

يعتبر الفصل الكهربائي للهلام تقنية أساسية في البيولوجيا الجزيئية، وتستخدم على نطاق واسع لفصل البروتينات والأحماض النووية والجزيئات الكبيرة الأخرى. يعد التحكم السليم في حجم العينة والجهد والوقت الكهربائي أمرًا بالغ الأهمية لتحقيق نتائج دقيقة وقابلة للتكرار.يقدم زميلنا في المختبرأفضل الممارسات لإدارة هذه المعلمات أثناء الفصل الكهربائي للهلام SDS-PAGE.

بكين Liuyi منتجات هلام التكنولوجيا الحيوية الكهربائية

حجم العينة: ضمان الاتساق

عند إجراء الترحيل الكهربائي SDS-PAGE، يعد حجم العينة عاملاً رئيسيًا يمكن أن يؤثر بشكل كبير على دقة نتائجك. يوصى عمومًا بتحميل 10 ميكرولتر من البروتين الإجمالي لكل بئر. لضمان الاتساق ومنع انتشار العينة بين الآبار المجاورة، من المهم تحميل حجم مساوٍ من المخزن المؤقت للتحميل 1x في أي آبار فارغة. ويساعد هذا الاحتياط على منع انتشار العينات إلى الممرات المجاورة، وهو ما يمكن أن يحدث إذا تركت البئر فارغة.

قبل تحميل العينات الخاصة بك، ابدأ دائمًا بإضافة علامة الوزن الجزيئي إلى بئر واحدة. وهذا يسمح بسهولة التعرف على أحجام البروتين بعد الكهربائي.

التحكم في الجهد: موازنة السرعة والدقة

يؤثر الجهد الكهربائي المطبق أثناء الفصل الكهربائي بشكل مباشر على كل من السرعة التي تهاجر بها العينات عبر الجل ودقة الفصل. بالنسبة لـ SDS-PAGE، من المستحسن البدء بجهد منخفض يبلغ حوالي 80 فولت. يسمح هذا الجهد المنخفض الأولي للعينات بالهجرة ببطء وبشكل متساوٍ، مع تركيزها في شريط حاد عند دخولها إلى هلام الفصل.

بمجرد دخول العينات بشكل كامل إلى هلام الفصل، يمكن زيادة الجهد إلى 120 فولت. يعمل هذا الجهد العالي على تسريع عملية الهجرة، مما يضمن فصل البروتينات بكفاءة وفقًا لوزنها الجزيئي. ومن الضروري مراقبة التقدم المحرز في الجبهة الصبغة الزرقاء بروموفينول، مما يشير إلى الانتهاء من التفريد. بالنسبة للمواد الهلامية بتركيز 10-12%، عادة ما يكون 80-90 دقيقة كافيًا؛ ومع ذلك، بالنسبة للمواد الهلامية بنسبة 15%، قد تحتاج إلى تمديد وقت التشغيل قليلاً.

إدارة الوقت: معرفة متى تتوقف

التوقيت هو عامل حاسم آخر في الكهربائي للهلام. يمكن أن يؤدي تشغيل الجل لفترة طويلة جدًا أو قصيرة جدًا إلى الانفصال دون المستوى الأمثل. يعد انتقال صبغة البروموفينول الزرقاء مؤشرًا مفيدًا: عندما تصل إلى قاع الهلام، يكون الوقت قد حان عادةً لإيقاف التشغيل. بالنسبة للمواد الهلامية القياسية، مثل 10-12%، تكون مدة الرحلان الكهربائي التي تتراوح بين 80-90 دقيقة كافية عادةً. بالنسبة للمواد الهلامية ذات النسبة الأعلى، مثل 15%، يجب تمديد وقت التشغيل لضمان الفصل الكامل للبروتينات.

إدارة المخزن المؤقت: إعادة استخدام وإعداد المخزن المؤقت

يمكن إعادة استخدام المخزن المؤقت للرحلان الكهربائي مرة أو مرتين، وفقًا لظروف المختبر الخاصة بك. ومع ذلك، للحصول على أفضل النتائج، فمن المستحسن إعداد المخزن المؤقت الطازج 10x وتخفيفه قبل الاستخدام مباشرة. وهذا يضمن أن يحافظ المخزن المؤقت على فعاليته، مما يؤدي إلى نتائج رحلان كهربائي أكثر موثوقية.

بكين Liuyi منتجات هلام التكنولوجيا الحيوية الكهربائية

من خلال التحكم بعناية في حجم العينة والجهد ووقت الفصل الكهربائي، يمكنك تحسين دقة وإمكانية تكرار نتائج الفصل الكهربائي للهلام بشكل كبير. سيساعدك تنفيذ أفضل الممارسات هذه في عملك المختبري على تحقيق نطاقات أكثر وضوحًا وتميزًا، مما يؤدي إلى بيانات أفضل للتحليل النهائي.

إذا كان لديك المزيد من الطرق الجيدة لتحسين تجربة الفصل الكهربائي للهلام، فمرحبًا بك للمناقشة معنا!

شركة Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) متخصصة في تصنيع أدوات الرحلان الكهربائي لأكثر من 50 عامًا مع فريقنا الفني المحترف ومركز البحث والتطوير. لدينا خط إنتاج موثوق وكامل بدءًا من التصميم وحتى الفحص والمستودعات، بالإضافة إلى دعم التسويق. منتجاتنا الرئيسية هي خلية الرحلان الكهربي (الخزان/الغرفة)، وإمدادات الطاقة الكهربية، وجهاز Transilluminator LED الأزرق، وجهاز Transilluminator للأشعة فوق البنفسجية، ونظام تحليل الصور والتحليل وما إلى ذلك. كما نقوم بتوريد أدوات المختبر مثل أداة PCR، وخلاط الدوامة، وأجهزة الطرد المركزي للمختبر.

إذا كان لديك أي خطة شراء لمنتجاتنا، فلا تتردد في الاتصال بنا. يمكنك أن ترسل لنا رسالة على البريد الإلكتروني[البريد الإلكتروني محمي]أو[البريد الإلكتروني محمي]، أو يرجى الاتصال بنا على +86 15810650221 أو إضافة Whatsapp +86 15810650221، أو Wechat: 15810650221.

يرجى مسح رمز الاستجابة السريعة ضوئيًا لإضافته على Whatsapp أو WeChat.