فحص المذنب (الرحلان الكهربي للخلية الواحدة، SCGE) هو تقنية حساسة وسريعة تستخدم في المقام الأول للكشف عن تلف الحمض النووي وإصلاحه في الخلايا الفردية. يأتي اسم "فحص المذنب" من الشكل المميز الذي يشبه المذنب والذي يظهر في النتائج: تشكل نواة الخلية "الرأس"، بينما تهاجر شظايا الحمض النووي التالفة، مكونة "ذيلاً" يشبه المذنب.
مبدأ
يعتمد مبدأ فحص المذنب على هجرة أجزاء الحمض النووي في مجال كهربائي. يبقى الحمض النووي السليم داخل نواة الخلية، بينما يهاجر الحمض النووي التالف أو المجزأ نحو القطب الموجب، مشكلًا "ذيل" المذنب. يتناسب طول وكثافة الذيل بشكل مباشر مع مدى تلف الحمض النووي.
إجراء
- تحضير الخلية: يتم خلط الخلايا المراد اختبارها مع الاغاروز منخفض نقطة الانصهار ونشرها على شرائح المجهر لتشكيل طبقة موحدة.
- تحلل الخلية: يتم غمر الشرائح في محلول تحلل لإزالة غشاء الخلية والغشاء النووي، وكشف الحمض النووي.
- الرحلان الكهربائي: يتم وضع الشرائح في غرفة الرحلان الكهربي تحت ظروف قلوية أو متعادلة. تهاجر شظايا الحمض النووي التالفة نحو القطب الموجب تحت تأثير المجال الكهربائي.
- تلطيخ: بعد الترحيل الكهربائي، يتم تلوين الشرائح بصبغة الفلورسنت (على سبيل المثال، بروميد الإيثيديوم) لتصور الحمض النووي.
- التحليل المجهري: باستخدام المجهر الفلوري أو البرامج المتخصصة، يتم تحليل أشكال المذنب، ويتم قياس المعلمات مثل طول الذيل وكثافته.
الصورة من بيورندر
تحليل البيانات
يتم تقييم نتائج فحص المذنب بناءً على عدة معايير رئيسية:
- طول الذيل: يمثل المسافة التي يهاجرها الحمض النووي، مما يشير إلى مدى تلف الحمض النووي.
- محتوى الحمض النووي الذيل: النسبة المئوية للحمض النووي الذي ينتقل إلى الذيل، وغالبًا ما تستخدم كمقياس كمي لتلف الحمض النووي.
- لحظة ذيل الزيتون (OTM): يجمع بين طول الذيل ومحتوى الحمض النووي الذيل لتوفير قياس أكثر شمولاً لتلف الحمض النووي.
التطبيقات
- دراسات السمية الجينية: يُستخدم اختبار المذنب على نطاق واسع لتقييم تأثيرات المواد الكيميائية والأدوية والإشعاع على الحمض النووي للخلية، مما يجعله أداة رئيسية لاختبار السمية الجينية.
- علم السموم البيئية: يساعد في تحليل تأثير الملوثات البيئية على الحمض النووي للكائنات الحية، مما يوفر نظرة ثاقبة حول سلامة النظام البيئي.
- البحوث الطبية والسريرية: يستخدم اختبار المذنب في دراسة آليات إصلاح الحمض النووي والسرطان والأمراض الأخرى المرتبطة بالحمض النووي. كما يقوم بتقييم تأثير علاجات السرطان مثل العلاج الإشعاعي والعلاج الكيميائي على الحمض النووي.
- علوم الأغذية والزراعة: يستخدم لتقييم سلامة المبيدات والمضافات الغذائية وغيرها من المواد ودراسة آثارها السامة في النماذج الحيوانية.
المزايا
- حساسية عالية: قادر على اكتشاف المستويات المنخفضة من تلف الحمض النووي.
- عملية بسيطة: هذه التقنية واضحة ومباشرة، مما يجعلها مناسبة للفحص عالي الإنتاجية.
- تطبيق واسع: يمكن تطبيقه على أنواع مختلفة من الخلايا، بما في ذلك الخلايا الحيوانية والنباتية.
- تحديات القياس الكمي: أثناء توفير بيانات نوعية عن تلف الحمض النووي، يعتمد التحليل الكمي بشكل كبير على تقنيات تحليل البرمجيات والصور.
- الظروف التجريبية: يمكن أن تتأثر النتائج بعوامل مثل وقت الرحلان الكهربائي ودرجة الحموضة، مما يتطلب مراقبة دقيقة للظروف التجريبية.
القيود
يعد اختبار Comet أداة لا تقدر بثمن في أبحاث الطب الحيوي والعلوم البيئية وتطوير الأدوية نظرًا لمرونته وحساسيته العالية في اكتشاف تلف الحمض النووي وإصلاحه. شركة بكين Liuyi للتكنولوجيا الحيوية المحدودة (Liuyi للتكنولوجيا الحيوية)يقدم غرفة الرحلان الكهربائي الأفقي لفحص المذنب. مرحبا بكم في الاتصال بنا لمناقشة حولفحص المذنببروتوكول.
شركة Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) متخصصة في تصنيع أدوات الرحلان الكهربائي لأكثر من 50 عامًا مع فريقنا الفني المحترف ومركز البحث والتطوير. لدينا خط إنتاج موثوق وكامل بدءًا من التصميم وحتى الفحص والمستودعات، بالإضافة إلى دعم التسويق. منتجاتنا الرئيسية هي خلية الرحلان الكهربي (الخزان/الغرفة)، وإمدادات الطاقة الكهربية، وجهاز Transilluminator LED الأزرق، وجهاز Transilluminator للأشعة فوق البنفسجية، ونظام تحليل الصور والتحليل وما إلى ذلك. كما نقوم بتوريد أدوات المختبر مثل أداة PCR، وخلاط الدوامة، وأجهزة الطرد المركزي للمختبر.
إذا كان لديك أي خطة شراء لمنتجاتنا، فلا تتردد في الاتصال بنا. يمكنك أن ترسل لنا رسالة على البريد الإلكتروني[البريد الإلكتروني محمي]أو[البريد الإلكتروني محمي]، أو يرجى الاتصال بنا على +86 15810650221 أو إضافة Whatsapp +86 15810650221، أو Wechat: 15810650221.
يرجى مسح رمز الاستجابة السريعة ضوئيًا لإضافته على Whatsapp أو WeChat.
وقت النشر: 20 سبتمبر 2024