1. التصنيف
وينقسم الترحيل الكهربي للهلام إلى أنواع رأسية (بما في ذلك المواد الهلامية العمودية والمواد الهلامية اللوحية) وأنواع أفقية (الألواح الهلامية بشكل أساسي) (الشكل 6-18). عموما، الفصل الرأسي يتفوق قليلا على الأفقي، ولكن إعداد هلام الأفقي له أربع مزايا على الأقل: هناك دعم تحت الجل بأكمله، مما يسمح باستخدام الاغاروز منخفض التركيز؛ فمن الممكن إعداد لوحات هلام الاغاروز بمواصفات مختلفة؛ يعد إعداد الجل وتحميل العينات أكثر ملاءمة؛ غرفة الرحلان الكهربائي سهلة البناء وفعالة من حيث التكلفة. بما أن الترحيل الكهربائي الأفقي يتم إجراؤه مع غمر لوحة هلام الاغاروز بالكامل بحوالي 1 مم تحت سطح المخزن المؤقت للرحلان الكهربائي، فإنه يُسمى أيضًا بالرحلان الكهربائي المغمور.
خزان الرحلان الكهربي DYCP-31DN للرحلان الكهربي لهلام الاغاروز
2. نظام المخزن المؤقت
في فصل الحمض النووي، تعتمد معظم الأنظمة الأنظمة المستمرة. تشتمل المحاليل المؤقتة للرحلان الكهربائي شائعة الاستخدام على TBE (0.08 مول/لتر تريس · حمض الهيدروكلوريك، درجة الحموضة 8.5، 0.08 مول/لتر حمض البوريك، 0.0024 مول/لتر EDTA) والعازلة (0.04 مول/لتر تريس · حمض الهيدروكلوريك، درجة الحموضة 7.8، 0.02 مول/لتر). خلات الصوديوم، 0.0018 مول/لتر EDTA) عازل. يتم إعداد هذه المخازن المؤقتة بشكل عام على شكل محاليل مخزون 10x ويتم تخفيفها إلى التركيز المطلوب عند الاستخدام. تختلف معدلات هجرة الحمض النووي الخطي والدائري في هلام الاغاروز باختلاف المخزن المؤقت المستخدم. في المخزن المؤقت THE، يكون معدل هجرة الحمض النووي الخطي أكبر من معدل هجرة الحمض النووي الدائري، بينما في المخزن المؤقت TBE، يكون العكس صحيحًا.
3. تحضير جل الاغاروز
(1) إعداد هلام الاغاروز الأفقي
(أ) إعداد التركيز المطلوب من هلام الاغاروز باستخدام 1X العازلة الكهربائي.
(ب) تسخين الاغاروز حتى يكتمل الذوبان إما في حمام مائي مغلي، أو على محرك مغناطيسي، أو في الميكروويف. تبريد محلول الاغاروز إلى 55 درجة مئوية وإضافة بروميد إيثيديوم (EB) صبغة إلى تركيز نهائي قدره 0.5 ميكروغرام / مل.
(ج) ختم حواف الزجاج أو لوحات الاكريليك مع كمية صغيرة من هلام الاغاروز وإضافة مشط ووضع أسنان المشط حوالي 0.5 ~ 1.0 مم فوق اللوحة.
(د) صب محلول هلام الاغاروز الذائب بشكل مستمر في قالب لوحة الزجاج أو الأكريليك (سمك يعتمد على حجم عينة الحمض النووي)، وتجنب إدخال فقاعات الهواء. دعها تصلب بشكل طبيعي في درجة حرارة الغرفة.
(هـ) قم بإزالة المشط بعناية بعد التصلب الكامل. أضف كمية مناسبة من المخزن المؤقت للتفريد الكهربائي إلى خزان الجل، مع التأكد من غمر لوحة الجل حوالي 1 مم تحت سطح المخزن المؤقت للتفريد الكهربائي.
(2) إعداد هلام الاغاروز العمودي
(أ) إزالة الشحوم أو البقايا من الألواح الزجاجية عن طريق الغسيل بالإيثانول.
(ب) ضع ألواح المباعد بين السدود الأمامية والخلفية، وقم بمحاذاة حواف ألواح المباعد مع السدود الأمامية والخلفية، وثبتها بالمشابك.
(ج) إضافة 2% [اغروس] في المخزن المؤقت 1x بين حواف لوحات المباعدة لتشكيل سدادة [اغروس] عالية 1 سم في الجزء السفلي من غرفة صب الجل.
(د) صب هلام الاغاروز المذاب بالتركيز المطلوب، المحضر في المخزن المؤقت 1x، في حجرة الجل حتى 1 سم تحت الجزء العلوي.
(هـ) أدخل المشط، وتجنب احتباس فقاعات الهواء تحت أسنان المشط. في بعض الأحيان، قد تظهر التجاعيد على أسنان المشط أثناء تبريد هلام الاغاروز؛ في مثل هذه الحالات، ما عليك سوى إضافة بعض الاغاروز المذاب في الأعلى لترسيخه.
(و) قم بإزالة المشط. لمنع تسرب المخزن المؤقت في فتحة التحميل، قم بإغلاق الاتصال بين لوحة هلام الاغاروز وغرفة التفريد مع 2٪ الاغاروز وإضافة الكمية المطلوبة من المخزن المؤقت.
(ز) إضافة 1X العازلة الكهربائي إلى غرفة الجل.
(ح) تحميل عينات الحمض النووي بعناية على هلام الاغاروز تحت المخزن المؤقت.
مزيد من المعلومات حول المعرفة الأساسية حول الترحيل الكهربائي لهلام الاغاروز، سنشاركها في الأسبوع المقبل. أتمنى أن تكون هذه المعلومات مفيدة لتجربتك.
شركة Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) متخصصة في تصنيع أدوات الرحلان الكهربائي لأكثر من 50 عامًا مع فريقنا الفني المحترف ومركز البحث والتطوير. لدينا خط إنتاج موثوق وكامل بدءًا من التصميم وحتى الفحص والمستودعات، بالإضافة إلى دعم التسويق. منتجاتنا الرئيسية هي خلية الرحلان الكهربائي (الخزان / الحجرة) وإمدادات الطاقة الكهربية وجهاز Transilluminator LED الأزرق وجهاز Transilluminator للأشعة فوق البنفسجية ونظام تحليل الصور الهلامية وما إلى ذلك.
نحن نبحث الآن عن شركاء، ونرحب بكل من خزان الرحلان الكهربائي OEM والموزعين.
إذا كان لديك أي خطة شراء لمنتجاتنا، فلا تتردد في الاتصال بنا. يمكنك أن ترسل لنا رسالة على البريد الإلكتروني[البريد الإلكتروني محمي]أو[البريد الإلكتروني محمي]، أو يرجى الاتصال بنا على +86 15810650221 أو إضافة Whatsapp +86 15810650221، أو Wechat: 15810650221.
يرجى مسح رمز الاستجابة السريعة ضوئيًا لإضافته على Whatsapp أو WeChat.
وقت النشر: 07 ديسمبر 2023